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一种分泌表达海蠕虫透明质酸水解酶的重组酿酒酵母菌株
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本发明公开了一种分泌表达海蠕虫透明质酸水解酶的重组酿酒酵母菌株,属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将来源于Capitella teleta的透明质酸水解酶基因克隆连接到酿酒酵母整合表达载体pRS305,通过将启动子置换,添加信号肽,在基因N端添加氨基酸短肽等手段,获得质粒pGAP(m)‑sp23‑6×Gln‑HAase,并转化酿酒酵母宿主S.cerevisiae CEN.PK2‑1C,从而构建高产透明质酸水解酶的重组菌株命名为S.cerevisiae CEN.PK2‑1C‑pGAP(m)‑sp23‑6×Gln‑HAase。在3L罐中,重组S.cerevisiae菌株胞外表达的透明质酸水解酶的活力可达1.26×106U/mL,相比重组菌株S.cerevisiae pRS305‑HAase的胞内酶活2.05×105U/mL,提高了5.1倍。本发明利用酿酒酵母为宿主发酵得到的透明质酸水解酶对透明质酸具有高选择性和高活力,具有重要的应用前景。
本发明公开了一种分泌表达海蠕虫透明质酸水解酶的重组酿酒酵母菌株,属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将来源于Capitella teleta的透明质酸水解酶基因克隆连接到酿酒酵母整合表达载体pRS305,通过将启动子置换,添加信号肽,在基因N端添加氨基酸短肽等手段,获得质粒pGAP(m)‑sp23‑6×Gln‑HAase,并转化酿酒酵母宿主S.cerevisiae CEN.PK2‑1C,从而构建高产透明质酸水解酶的重组菌株命名为S.cerevisiae CEN.PK2‑1C‑pGAP(m)‑sp23‑6×Gln‑HAase。在3L罐中,重组S.cerevisiae菌株胞外表达的透明质酸水解酶的活力可达1.26×106U/mL,相比重组菌株S.cerevisiae pRS305‑HAase的胞内酶活2.05×105U/mL,提高了5.1倍。本发明利用酿酒酵母为宿主发酵得到的透明质酸水解酶对透明质酸具有高选择性和高活力,具有重要的应用前景。
商品类型 专利 申请号 201811172714.5 所属行业 暂缺
专利类型 发明 法律状态 有权 IPC分类号 C12N1/19
交易方式 技术转让 专利状态 已授权 授权号
技术领域 生物与新医药 有效期至 长久有效 授权日
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